Kas olete kunagi tahtnud baktereid kasvatada teadusprojekti või lihtsalt lõbu pärast? See on üllatavalt lihtne! Kõik, mida vajate, on toitaineagar (spetsiaalne želatiinne kasvumaterjal), mitu steriliseeritud Petri tassi ja mõned vastikult head bakteriallikad!
1
Valmistage agar ette. Agar on tarretisesarnane aine, mida kasutatakse bakterite kasvatamiseks. See on valmistatud teatud tüüpi punavetikatest, mis pakuvad ideaalset kasvupinda paljudele erinevat tüüpi bakteritele. Teatud tüüpi agar sisaldab lisatud toitaineid (nt lambaveri), mis aitavad kaasa bakterite jõulisemale kasvule. Selles katses on kõige lihtsam kasutada pulbrilist toiteagarit. Teil on vaja nii palju agarit kui vaja, kuid ärge kasutage vähem kui 1,2 grammi (½ teelusikatäit) agaripulbrit iga 10 sentimeetri (3,9 tolli) Petri tassi kohta, mida soovite kasutada. Segage kuumakindlas tassis või kausis 1,2 grammi (½ teelusikatäit) toitaineagari pulbrit 60 milliliitrisse (0,25 Â c) kuuma vette. Korrutage need kogused mitme Petri tassiga, mida kavatsete kasutada. Asetage kauss või tass mikrolaineahju ja laske sellel 1 või enam minutit keema hakata, jälgides, et agarilahus üle ei keeks. Lahus on valmis, agaripulber peab olema täielikult lahustunud ja vedelik selget värvi. Laske agarilahusel enne jätkamist mitu minutit jahtuda. Sa ei taha kõrvetada!
2
Valmista Petri tassid. Petri tassid on väikesed lameda põhjaga anumad, mis on valmistatud läbipaistvast klaasist või plastikust. Neil on kaks poolt – ülemine ja alumine –, mis pestakse üksteisesse. See kaitseb sisu soovimatu saastunud õhu eest, kuid võimaldab ka bakterite tekitatud gaasidel välja pääseda. Petri tassid tuleb enne bakterite kasvatamiseks kasutamist täielikult steriliseerida, vastasel juhul võivad katse tulemused mõjutada. Äsja ostetud Petri tassid peavad olema eelnevalt steriliseeritud ja suletud plastpakendisse. Eemaldage Petri tass pakendist ja eraldage kaks poolt. Valage väga ettevaatlikult soe agarilahus Petri tassi alumisse poolde – täpselt nii palju, et tekiks tassi põhja kiht. Töötage kõrge leegiga küünla või Bunseni põleti juuresolekul, et hoida saastatust madalal. Asendage kiiresti Petri tassi ülemine pool, et vältida õhus levivate bakterite katse saastumist. Pange Petri tassid kõrvale 30 minutiks kuni 2 tunniks, kuni agarilahus jahtub ja kõveneb (kui see on valmis, meenutab see komplekti Jell-O).
3
Hoidke Petri tassid külmkapis kuni kasutusvalmis. Kui te ei kavatse agariga täidetud Petri tasse kohe kasutada, tuleb neid hoida külmikus, kuni olete valmis katsega jätkama. Petri tasside külmikus hoidmine takistab tasside sees oleva vee aurustumist (bakterid). vajavad kasvamiseks niisket keskkonda). Samuti võimaldab see agari pinnal veidi kõveneda, mis hoiab ära bakteriproovide teisaldamise ajal rebenemise või läbilõikamise. Petri tasside külmikus hoidmisel tuleb nõud asetada tagurpidi. See aitab vältida kondensaadi kaanele langemist ja kasvupinna häirimist. Agariga täidetud Petri tassid säilivad külmkapis paar kuud. Kui olete valmis neid kasutama, eemaldage need külmkapist ja laske neil enne proovide sisestamist toatemperatuurini soojeneda.
4
Viige Petri tassidele baktereid. Kui agarilahus on tahenenud ja Petri tassid toatemperatuuril, olete valmis lõbusaks osaks – bakterite tutvustamiseks. Selleks on paar meetodit – otsese kontakti või proovide võtmise teel. Otsene kontakt: see on siis, kui bakterid kantakse Petri tassile otsekontakti kasutades, st agarit puudutades. Üks levinumaid viise selleks on lihtsalt sõrmeotsa vajutamine (kas enne või pärast käte pesemist) kergelt agari pinnale. Kuid võite proovida ka sõrmeküüne või vana mündi pinna agarisse surumist või isegi väikese karvakese või piimatilgakese asetamist nõusse. Kasutage steriilset vatitampooni, kui see on saadaval. Kasutage oma kujutlusvõimet!Näidiste kogumine: Selle meetodi abil saate koguda baktereid peaaegu igalt pinnalt ja kanda need Petri tassile, vaja on vaid puhtaid vatitampooni. Lihtsalt haarake tampoonist ja libistage sellega üle mis tahes pinna, mis teile tundub – suu sisemus, uksekäepide, arvuti klaviatuuri klahvid või kaugjuhtimispuldi nupud – seejärel kasutage seda agari pinnale triibutamiseks. (rebimata). Nendes kohtades leidub palju baktereid ja need peaksid andma mõne päeva jooksul huvitavaid (ja vastikut) tulemusi. Soovi korral võite igasse Petri tassi asetada rohkem kui ühe bakteriproovi – piisab, kui jagada jagage tass kvadrantideks (veeranditeks) ja pühkige igas neist erinev bakteriproov. Kontrollrühmana kasutamiseks on soovitatav hoida üks Petri tassi kvadrand bakteriproovist puhtana. See võimaldab teil teada saada, kas agar oli enne bakteriproovide sisestamist saastunud.
5
Märgistage ja pitseerige Petri tassid. Kui olete bakterid sisse toonud, pange Petri tassile kaas tagasi ja sulgege see mõne parafilmi või Sarani ümbrisega. Märgistage igale Petri tassile kindlasti selles sisalduvate bakterite allikas, vastasel juhul ei saa te ütle kumb on kumb. Seda saate teha kleeplindi ja markeri abil. Ettevaatusabinõuna võite panna iga Petri tassi lukuga lukuga kotti. See annab täiendava kaitsekihi võimalike ohtlike bakterikolooniate eest, mis võivad tekkida, kuid võimaldab siiski vaadata Petri tassi sisu.
6
Asetage Petri tassid sooja ja pimedasse kohta. Jätke Petri tassid mitmeks päevaks sooja ja pimedasse kohta, kus bakterid võivad häirimatult areneda. Ärge unustage hoida nõusid tagurpidi, et veepiisad ei häiriks bakterite kasvu. Ideaalne temperatuur bakterite kasvatamiseks on vahemikus 70–98 °F (20–37 °C). Vajadusel võite asetada Petri tassid jahedamasse kohta, kuid bakterid kasvavad palju aeglasemalt. Laske bakteritel areneda 4-6 päeva, kuna see annab kultuuridele piisavalt aega kasvamiseks. Kui bakterid hakkavad vohama, võite märgata nõudest tulevat lõhna.
7
Salvestage oma tulemused. Paari päeva pärast märkate, et igas Petri tassis kasvab hämmastavalt palju baktereid, hallitusseente ja seeni. Kasutage märkmikku, et salvestada oma tähelepanekud iga tassi sisu kohta ja jõuda järeldusele, millistes kohtades oli kõige rohkem baktereid. .Kas see oli su suu sisemus? Ukse käepide? Teie kaugjuhtimispuldi nupud? Tulemused võivad teid üllatada! Soovi korral saate mõõta bakterikolooniate igapäevast kasvu, kasutades viltotsaga markerit, et jälgida Petri tassi põhjas iga koloonia ümber ring. Mõne päeva pärast peaks teil olema iga tassi põhjas kontsentriliste rõngaste kogu. See aitab teil andmeid lugeda ja salvestada.
8
Kontrollige antibakteriaalsete ainete tõhusust. Selle katse huvitav variant on lisada Petri tassile antibakteriaalne aine (kätepuhastusvahend, seep jne), et testida selle tõhusust. Kui olete Petri tassile bakterid sisestanud, asetage vatitikuga väike tükk. tilk kätepuhastusgeeli, desinfitseerivat seepi või majapidamises kasutatavat valgendit bakteriproovi keskele, seejärel jätkake katset nagu tavaliselt. Bakterite kasvades tassis peaksite nägema rõngast või “halot” selle koha ümber, kuhu asetasite antibakteriaalne aine, kus baktereid ei kasva. Seda nimetatakse “tapmistsooniks” (või täpsemalt “inhibeerimistsooniks”). Saate mõõta erinevate antibakteriaalsete ainete tõhusust, võrreldes iga Petri tassi tapmistsoonide suurust. Mida laiem on tapmistsoon, seda tõhusam on antibakteriaalne aine.
9
Võtke kasutusele asjakohased ettevaatusabinõud. Enne kui proovite oma Petri tasse ära visata, peate esmalt võtma kasutusele asjakohased ettevaatusabinõud. Kuigi enamik teie kasvatatavaid baktereid ei ole ohtlikud, võivad suured bakterikolooniad kujutada endast suuremat ohtu – seega peate need enne tapma. kõrvaldamine majapidamises kasutatava valgendiga.Kaitske oma käsi valgendi eest kummikindaid kandes, kaitske silmi plastikprillidega ja kaitske riideid põllega. Katke lahtised lõikehaavad kummikinnastega ja vältige bakterite allaneelamist või sissehingamist, kui see kasvab.
10
Valage Petri tassidesse valgendi. Avage Petri tass ja valage ettevaatlikult väike kogus valgendit bakterikolooniate peale, hoides tassi kraanikausi kohal. See hävitab bakterid. Olge väga ettevaatlik, et pleegitusaine ei puutuks teie nahka, sest see põleb. Seejärel asetage desinfitseeritud Petri tass lukuga kilekotti ja visake kott prügikasti.