RNA roll valgusünteesis on äärmiselt oluline, kuna valgusüntees ei saaks toimuda ilma RNAta. RNA kolm vormi eksisteerivad ainult valkude loomiseks. Translatsioonina tuntud protsessi kaudu konstrueerib RNA elutegevuseks vajalikud valgud. RNA mängib rolli translatsiooni igas etapis, toimides valkude sünteesi mallina ja kogudes valkude konstrueerimiseks vajalikke komponente.
RNA on olemas kõigis elusorganismides; see on DNA-s sisalduvate geneetiliste juhiste ühekordne koopia. Rakud loovad RNA-d läbi protsessi, mida nimetatakse transkriptsiooniks. DNA kaksikheeliksi ajutine lahtipakkimine võimaldab RNA polümeraasil moodustada ühe RNA ahela, millel on valkude sünteesi juhised. Eukarüootsetes organismides, mis on peaaegu kõik elusorganismid, lahkub RNA raku tuumast enne translatsiooni algust. Prokarüootidena tuntud organismides, millel puudub rakutuum, toimuvad transkriptsioon ja translatsioon samaaegselt kõrvuti.
RNA roll valgusünteesis algab siis, kui transkriptsioon lõppeb ja translatsiooni geneetilised juhised on valmis. See RNA ahel, tuntud kui messenger RNA (mRNA), seondub ribosoomiga, rakus oleva organelliga. Ribosoom on valmistatud molekulist, mida tuntakse ribosomaalse RNA (rRNA) nime all. rRNA toimib “tehase põrandana”, kus võib toimuda valgusüntees. Kui rRNA ja mRNA on omavahel ühendatud, võib toimuda translatsioon.
Kui mRNA ahel on kinnitunud ribosoomil oleva rRNA molekuliga, mängib valgu sünteesis rolli kolmas RNA molekul, ülekande-RNA (tRNA). Paljud tRNA molekulid koguvad vajalikke aminohappeid, mis on juba raku tsütoplasmas. Järgides mRNA ahela juhiseid, asetavad tRNA molekulid aminohapped valgule õigesse kohta. Kasvav valk algab pika polüpeptiidahelana, enne kui see hakkab enda peale voltima. See voltimisprotsess loob keeruka kolmemõõtmelise kuju, mille dikteerivad mRNA juhised.
RNA rollil valgusünteesis on ka teisi tahke. Lisaks valgu loomise juhistele sisaldab mRNA ka juhiseid valgusünteesi alustamiseks ja lõpetamiseks. Neid geneetilise koodi markereid tuntakse algus- ja lõppkoodonitena, mis on ainulaadne kolmest aluspaarist koosnev seeria. Teised võimalikud aluspaaride kombinatsioonid kodeerivad spetsiifilisi aminohappeid. Sellel lihtsal RNA protsessil valgusünteesis on kahekordne kasu: translatsioon toimub kiiresti ja kasvavas valgus on väiksem võimalus viga teha.
Vigaste valkude tootmise eest kaitsmiseks on valgusünteesi RNA-l sisseehitatud kaitsemeetmed vigade parandamiseks. Selle töö eest vastutavad rRNA ja ümbritsevad ribosoomid. Kui juhtub viga, eraldab ribosoom vale aminohappe ja ootab, kuni tRNA molekul edastab õige aminohappe. Seejärel jätkub tõlkeprotsess takistamatult.