Puhvrid on enamiku laborikatsete oluline osa, kuna need aitavad hoida segude pH vahemikus 5,0–8,2. Sorenseni fosfaatpuhver on teie projektide jaoks mittetoksiline valik ja erinevalt kakodülaatpuhvrist ei sisalda see kahjulikke aineid. Seda tüüpi puhvri valmistamine pole keeruline, kuigi töö tegemiseks vajate keemiaalast tausta ja mõningaid põhilisi laboritarvikuid. Saate luua lihtsa puhvri, segades kokku täpses koguses kahealuselist naatriumfosfaati ja kaaliumfosfaati või kasutades kahealuselise naatriumfosfaadi ja ühealuselise naatriumfosfaadi kombinatsiooni.
1
Valage 2 L (8,5 Â c) destilleeritud vett kahte suurde korduvkasutatavasse anumasse. Kontrollige veelkord, kas kasutate puhvri jaoks täpselt 1 l (4,2 Â c). Kasutage alati kraani asemel destilleeritud vett, et pH oleks võimalikult täpne. Destilleeritud vett leiate enamikust laboritarvikuid müüvatest kauplustest. Igas mahutis peaks olema 1 l (4,2 Â c) destilleeritud vett.
2
Segage 35,76 g Naâ‚‚HPOâ‚„ 1 anumasse veega. Segage pulber, kuni see on vees täielikult lahustunud. Märgistage see kahealuselise naatriumfosfaadina, et puhvri koostisained ei seguneks.
3
Lisage teise anumasse 9,08 g ühealuselist kaaliumfosfaati. Segage koostisosa, kuni see on destilleeritud veega täielikult segunenud. Märgistage kindlasti ka see konteiner, et saaksite oma koostisosi eristada.
4
Lisage tühja anumasse 71,5 ml (0,302 c) NaHPO-d. Asetage oma töökohale suur korduvkasutatav klaasist anum ja valage seejärel sisse suur kogus kahealuselist naatriumfosfaati. Mõõtke anumasse täpselt 71,5 Â mL (0,302 Â c), et segu oleks täpne. Mahuti peab mahutama vähemalt 1 L (4,2 Â c) vedelikku.
5
Segage 28,5 mL (0,120 Â c) KHâ‚‚POâ‚„ Naâ’‚‚HPOâ‚„. Segage anumasse väike kogus kaaliumfosfaati. Kontrollige, kas lisate segule täpselt 28,5 Â mL (0,120 Â c), et puhvri pH oleks võimalikult täpne. Suhe peab olema täpne, vastasel juhul ei pruugi puhvri pH olla õige.
6
Kontrollige pH-d, et näha, kas see on 7,2. Võtke pH tester ja kleepige see segusse. Vaadake testelektroodilt, kas pH on 7,2 või kõrgem või madalam. Kui pH pole täpne, peate võib-olla looma uue segu, kasutades kahealuselise naatriumfosfaadi ja kaaliumfosfaadi täpsemaid suhteid. pH-testimise elektroodi saate enamikus laboritarvikuid müüvates kohtades.
7
Hoidke segu 2–3 nädalat temperatuuril 4 °C (39 °F). Sulgege fosfaatpuhvri mahuti ülaosa ja märgistage see praeguse kuupäevaga. Hoidke seda jahedas kohas ja kasutage seda alati, kui peate segu neutraliseerima. Mõne nädala pärast visake puhver välja ja tehke uus, kuna fosfaatpuhvrid võivad aja jooksul olla väikeste organismide kasvulavaks.
8
Segage 35,61 g NaHPO 1 liitris (4,2 c) destilleeritud vees. Valage suur kogus destilleeritud vett tühja korduvkasutatavasse anumasse ja segage mõõdetud pulber. Oodake, kuni koostisosa on täielikult lahustunud, seejärel märgistage konteiner.
9
Segage 27,6 g NaHâ‚‚POâ‚„ 1 l (4,2 Â c) destilleeritud vette. Mõõtke pulber destilleeritud vette ja segage mõlemad koostisosad kokku. Märgistage konteiner, et saaksite kõik puhvri koostisosad üksteisest eristada.
10
Tehke põhilahendus suure koguse Naâ‚‚HPO‚„. Mõelge, milline oleks teie fosfaatpuhvri pH. Saate muuta segu nii happeliseks kui 5,8 või aluseliseks kuni 8,0, olenevalt puhvri vahekorrast. Valage eraldi mahutisse 47,35 ml (0,2001 c) NaHPO-d, et muuta puhver aluseliseks, ja väiksem kogus, et muuta see happeliseks. Näiteks 47,35 ml (0,2001) puhver. Â Â c) NaHPO annab puhvri, mille pH on 8,0, samas kui 4 mL (0,017 Â c) annaks teile pH väärtuseks 5,8.
11
Lisage väike kogus NaHâ‚‚PO‚„. Valage 2,65 Â mL (0,0112 Â c) NaHâ‚‚POâ‚„ vedela NaHPO’ga anumasse. Puhvri valmistamise lõpetamiseks segage mõlemad koostisosad põhjalikult. Näiteks 46 ml (0,19 ° C) NaHPO ja 4 ml (0,017 ° C) NaHPO puhvrit annavad teile puhvri. pH on 5,8, samas kui 2,65 ml (0,0112 c) NaHPO ja 47,35 ml (0,2001 c) NaHPO annab pH väärtuseks rohkem kui 8.0. nagu 7,2, segage 36 ml (0,15 ° C) NaHPO-d 14 ml (0,059 c) NaHPO-ga.
12
Lahjendage puhver 50 mL (0,21 Â c) topeltdestilleeritud veega. Puhvri lahjendamiseks ja selle tõhusamaks muutmiseks valage segusse suur kogus puhastatud vett. Rusikareegel on, et puhver ja lahjendatud vesi peavad olema vahekorras 1:1.
13
Märgistage ja säilitage lahjendatud puhver temperatuuril 4 °C (39 °F). Sulgege korduvkasutatava mahuti ülaosa ja märgistage see fosfaatpuhvrina. Hoidke segu tõeliselt jahedas kohas 2-3 nädalat, kasutades vajadusel puhvrit. Mõne nädala pärast tehke uus partii, kuna fosfaatpuhvrid kipuvad soodustama soovimatut kasvu.