Kuidas ekstraheerida banaani DNA-d

DNA ehk desoksüribonukleiinhape on kõigis Maa elusorganismides, sealhulgas kõigis inimestes ja taimedes. DNA on vajalik, kuna see annab juhised igale organismi sees olevale rakule, mis ütleb, kuidas kasvada ja mida teha. Need juhised antakse DNA segmentide kaudu, mida nimetatakse geenideks. DNA on nii väike, et seda pole palja silmaga näha. Siiski on võimalus eraldada DNA materjali, mis on piisavalt suur, et seda puuviljadest, nagu banaanid, kiivid või maasikad, näha. Seda katset saab hõlpsasti teha kodus ja tõenäoliselt on teil juba suurem osa katse tegemiseks vajalikest asjadest.

1
Asetage isopropüülalkoholi pudel sügavkülma. Enne katse alustamist pange isopropüülalkoholi pudel sügavkülma. Võite ka alkoholi põhipudelist välja valada ja tühja puhtasse pudelisse või klaasi panna ning seejärel pudeli või klaasi sügavkülma panna. Ärge muretsege, isopropüülalkohol ei külmu tegelikult tahkeks nagu vesi. Proovige selles katses kasutada 90% või kõrgemat isopropüülalkoholi. Kui teil on aga kodus isopropüülalkoholi juba vähemalt 70%, võite seda kasutada. Kui teil pole isopropüülalkoholi, saate seda osta apteegist või apteegist. see on üsna odav.

2
Veenduge, et teil oleks selle katse jaoks küps banaan. Peate banaani purustama millekski, mis näeb välja nagu puding. Seetõttu peab banaan olema tõeliselt pehme ja küps. Teate, et see on tõesti küps, kui banaani väliskülg on tumekollane või pruun ja sellel on mustad laigud. Koorige banaani väliskülg ja murdke või lõigake katse jaoks umbes pool banaanist ära. Kui teil pole küpseid banaane, jätke üks enne selle katse tegemist letile, kuni see on peaaegu pruun. Võite kasutada ka blender banaani purustamiseks, kui te ei taha oodata banaani küpsemist.

3
Püreesta banaan plastikust taassuletavas sügavkülmakotis. Asetage see osa banaanist, mille te ära murdsite, taassuletavasse kilekotti. Veenduge, et kogu õhk oleks kotist väljas, ja seejärel sulgege see. Püreesta banaan kätega, kuni see näeb välja nagu puding. Sel viisil banaani püreestamiseks peaks kuluma minut või paar. Veenduge, et kõik tükid oleksid püreestatud. Võite proovida ka koti sees oleva banaani taignarulliga püreestada. Lihtsalt rullige taignarull üle koti edasi-tagasi, kuni see kõik on pudruks.

4
Sega mõõtetopsis kuum vesi ja sool. Valage kuuma vett otse kraanist mõõtetopsi, kuni teil on 1–2 °C (120 ml). Segage lusikaga vett 1 tl (4,9 ml) soolaga, kuni sool on täielikult lahustunud. Selles etapis kasutatakse soola, kuna sellel on positiivne elektrilaeng. DNA-l on seevastu negatiivne elektrilaeng. Kombineerides tasakaalustavad negatiivsed ja positiivsed laengud end ja võimaldavad DNA molekulidel koguneda. Kasutage kraanist kindlasti kuuma, auravat vett. Olge ettevaatlik, et käsitseda mõõtetopsi käepidemest, juhuks kui see on tõesti kuum. .Selleks sammuks sobib igasugune sool. Peenem lauasool lahustub aga kiiremini kui rammusam meresool.

5
Segage soola-vee segu purustatud banaaniga 30-45 sekundit. Avage uuesti plastikust suletav kott ja valage soola-vee segu ettevaatlikult püreestatud banaaniga kotti. Sulgege kott uuesti ja eemaldage võimalikult palju õhku. Kasutage oma kätega kotti liigutamiseks ja raputage, et soola-vesi ja banaan omavahel segada. Jätkake koti sisu segamist umbes 30–45 sekundit. Võimalik, et peate laskma soola-vee segul veidi jahtuda, enne kui selle kilekotti valate. Kui kott on käsitsemiseks liiga kuum, kui vesi on sees , kasutage selle hoidmiseks ahjukindaid.

6
Lisa kotti vedel nõudepesuseep ja sega banaani/soolveega. Mõõtke mõõtelusikaga 1–2 teelusikatäit (2,5 ml) vedelat nõudepesuseepi. Avage taassuletav plastikkott ja valage vedel nõudepesuseep. Sulgege kott uuesti ja eemaldage võimalikult palju õhku. Liigutage kotti kätega õrnalt, et segada vedel nõudepesuseep banaani/soolavee seguga. Selles etapis kasutatav seep lahustab lipiidid (või rasvad) DNA molekule ümbritsevates rakumembraanides. See võimaldab DNA molekulidel segus eraldada. Segage koti sisu õrnalt. Soovite lahustada kogu seebi banaani/soolavee segus, ilma et tekiks palju mulle. Nõudeseebi asemel võite kasutada ka šampooni.

7
Kinnitage kohvifilter kummiga kitsa klaasi ülaosale. Lükake paberist kohvifilter kõrge kitsa joogiklaasi ülaossa. Pöörake kohvifiltri ülaosa üle klaasi serva ja kinnitage see kummipaelaga. Kuigi olete filtri kummiga kinnitanud, võib teil tekkida vajadus filtri paigal hoidmiseks siiski kätt kasutada. hakka kraami sealt läbi valama.

8
Valage koti sisu klaasi. Avage plastikust taassuletav kott banaani/soola-vee/seebi seguga ja valage segu aeglaselt läbi kohvifiltri kõrgesse kitsasse klaasi. Ärge laske filtril üle voolata; mine aeglaselt. Selle protsessi lõpuleviimiseks võib kuluda mitu minutit. Purustatud banaan jääb filtrisse, vedelik aga filtreerub läbi klaasi. Kohvifiltri kaudu voolav vedelik on sisuliselt seebine soolane vesi, mis sisaldab banaani DNA molekule. DNA molekulid on ülejäänud banaanist eraldatud. banaani, seetõttu pole banaanipüree enam vaja. Kui kogu vedelik on filtrist läbi liikunud, võite filtri ja selle sisu ära visata.

9
Lisage isopropüülalkohol aeglaselt kallutatud kitsale klaasile. Võtke isopropüülalkohol sügavkülmast välja. Võtke kõrge kitsas klaas oma mittedomineeriva käega üles ja kallutage seda 45-kraadise nurga all ühele küljele. Kasutage oma domineerivat kätt, et valada isopropüülalkohol sisse nii, et see langeks aeglaselt mööda klaasi külge. Lõpetage valamine, kui klaasi filtreeritud vedela segu peal on umbes 1–2 tolli (2,5–5,1 cm) paksune isopropüülalkoholi kiht. Ärge valage isopropüülalkoholi otse vedelikku, mis on klaasis. klaas.Kui see on tehtud, peaksite nägema kahte erinevat vedelikukihti; banaan/seep/soolvesi põhjas ja alkohol peal. DNA molekulid on praegu lahustatud banaani/seebi/soolavee segus.

10
Jätke klaas letile vähemalt 8 minutiks. Kallutage kõrge kitsas klaas püsti ja asetage see letile. Seadke taimer 8 minutiks ja ärge puudutage klaasi. 8 minuti jooksul jälgige klaasi mullide ja liikumist. Nagu mainitud, on DNA molekulid praegu lahustatud banaani/seebi/soolavee segus. Alkoholi ja soola kombinatsioon põhjustab nende DNA molekulide sadenemise või tahkeks muutumise. Panime alkoholi sügavkülma, sest madalamal temperatuuril tekib rohkem DNA molekule. Klaasi võib jätta kauemaks kui 8 minutiks. Mida kauem te sellest lahkute, seda määratletumaks muutub DNA materjal.

11
Looge väikese pudeliga teaduslik salvestuskeskkond. Pikemaajaliseks säilitamiseks leidke väike läbipaistev klaaspudel. Võite kasutada täiesti uut pudelit või taaskasutada vana pudelit (näiteks varem vürtside jaoks kasutatud). Kui olete otsustanud vana pudelit uuesti kasutada, veenduge, et see oleks seest täiesti puhas ja etikett eemaldatud. Täitke pudel isopropüülalkoholiga.Dollaripood on suurepärane koht erinevate väikeste klaasanumate leidmiseks, mis võivad sel eesmärgil sobida. Isopropüülalkohol ei pea selleks toiminguks külm olema.

12
Kastke puidust varras klaasi ja segage seda aeglaselt. Torkake puidust varras kõrgesse kitsasse klaasi, kuni varda ots on kohas, kus isopropüülalkohol kohtub banaani/soola-vee/seebi seguga. Pöörake või segage selles piirkonnas puitvarrast aeglaselt ja jälgige, kas mullilised, nööriga tükid ei liiguks alkoholikihti. Laske DNA ahelatel ümber puiduvarda keerduda. See samm annab suurepärase võimaluse DNA-st pildistada.

13
Liigutage banaani DNA oma vastloodud säilituspudelisse. Võtke aeglaselt puidust varras, mille ümber on mähitud DNA, kõrgest kitsast klaasist välja. Asetage puidust varras väikesesse isopropüülalkoholiga täidetud pudelisse. Keerake puidust varrast veidi, et DNA ahel saaks vardast maha ja alkoholi sisse liikuda. Kui DNA on alkoholis, kinnitage pudeli kaas ja hoidke seda nii kaua, kui soovite.