Elu- või tervisekindlustuse taotlused sisaldavad sageli nikotiini tuvastamise testi. Gaasivedelikkromatograafia abil saab tuvastada nikotiini või selle peamise metaboliidi kotiniini uriinis, veres, süljes ja juukseproovides. Kotiniini mõõtmist uriinis peetakse kõige tundlikumaks nikotiini tuvastamise tehnikaks. Ükski neist testidest ei erista täiuslikult aktiivseid suitsetajaid, passiivseid või passiivseid suitsetajaid ja mittesuitsetajaid, kuna nikotiini metabolismi individuaalsed erinevused on väga erinevad. Kuid nikotiini tuvastamise testid annavad hea hinnangu nikotiini üldisele kokkupuutele.
Nikotiin on sõltuvust tekitav kemikaal, mida leidub sigarettides ja närimistubakas. Tubaka närimine või sissehingamine viib nikotiini kehasse, kus see metaboliseerub maksas ja eritub uriiniga. Nikotiini peamine metaboliit on kotiniin ja kotiniin on peamine nikotiini tuvastamise meetod, kuna selle poolestusaeg on kuni 10 korda pikem kui nikotiinil. Teisisõnu on see kehas stabiilne palju kauem. Nikotiini üledoosi kahtluse korral, näiteks kui laps sööb nikotiinikummi, mõõdetakse kotiniini asemel nikotiini.
Nikotiini tuvastamine juukseproovide abil on väljaspool eksperimentaalseid teste haruldane, kuna see on kallis. Juuksetestiga saab aga hinnata pikaajalist tubakatarbimist, sest see suudab tuvastada nikotiiniga kokkupuutumist kuni 10 päeva enne proovi võtmist. Sülje nikotiini testid on lihtsad ja mitteinvasiivsed; sülg imendub suust proovilapi või tampooni abil, kuid piisavalt suure proovi saamine võib olla keeruline. Suukuivusega lapsed või täiskasvanud ei pruugi analüüsiproovi jaoks piisavalt sülge toota. Süljetestid põhinevad ka väga hiljutisel nikotiiniga kokkupuutel ja ei pruugi eristada kergeid aktiivseid suitsetajaid passiivsetest suitsetajatest.
Vereproovid võimaldavad tuvastada kotiniini vereplasmas, kuigi vereproov nõuab palju rohkem töötlemist kui uriini- või süljeproovid. Vereproovi esmalt tsentrifuugitakse, et eraldada vererakud plasmast, ja seejärel sadestatakse rasked valgud välja. Katseklaasi tsentrifuugitakse teist korda ja asetatakse seejärel aurustisse, et eemaldada järelejäänud vedelik; kuivad valgud, sealhulgas kotiniin, lahustatakse metüülalkoholiga. Veel kord tsentrifuugitakse katseklaasi, et eraldada kõik ülejäänud rasked valgud, ning vedelik valatakse välja ja kasutatakse analüüsiks. See protsess on aeganõudvam ja kulukam kui uriini- või süljeanalüüs.
Nikotiini tuvastamine uriiniga on väga tundlik ja tuvastab isegi väikese passiivse suitsu taseme. See on kõige levinum meetod, mida kindlustusseltsid kasutavad aktiivsete suitsetajate eristamiseks passiivsetest suitsetajatest. Olenemata sellest, kas nikotiini tuvastatakse uriini, sülje või vereseerumi kaudu, on erinevus inimeste vahel, kes suitsetavad aktiivselt kolm või enam sigaretti päevas, ja nende inimeste vahel, kellel on palju passiivset suitsetamist. Tugevaid suitsetajaid saab eristada kergetest suitsetajatest ka kotiniini koguse järgi proovis.