Negatiivne ruumirõhk on isolatsioonitehnika, mida haiglad ja laborid saavad kasutada saasteainete esinemise keskkonna kontrollimiseks. Ruumis olevad õhusaasteained jäävad alarõhuga ruumis kontrolli alla, mitte ei leki ülejäänud rajatisse. Haiglates on see vajalik patsientide isolatsiooniruumides, kui patsiendil on sellised seisundid nagu tuberkuloos ja nad võivad haigust levitada tavalises ruumis või avatud palatis. Laborid võivad teatud tüüpi bioloogiliste ja keemiliste riskide kaitsmisel tugineda ka negatiivse rõhuga ruumidele.
See kontseptsioon põhineb asjaolul, et õhk liigub kõrge rõhuga piirkondadest madala rõhuga piirkondadesse. Õhurõhk tahab end võrdsustada ja õhk jätkab liikumist, kuni rõhk stabiliseerub. Negatiivse ruumirõhu korral juhib ventilatsioonisüsteem õhku välja kiiremini, kui õhk sisse saab. See tekitab alarõhku ja soodustab saalist õhu väljalaskmise asemel saalist õhku alarõhuruumi voolama.
Õhk ringleb läbi negatiivse rõhuga ruumi umbes 12 korda tunnis, et hoida seda värskena ja hingavana. Ruumist väljutatav õhk liigub läbi filtreerimissüsteemi, mis tõmbab välja saasteained ja suunab õhu ohutult ümbritsevasse keskkonda. Paljud bioloogilised ohutegurid on ultraviolettvalguse suhtes väga tundlikud ja lagunevad kiiresti, kui õhk väljub väljastpoolt. Ruumi negatiivse rõhuga ventilatsioonisüsteem võib välja lasta katusele või muule harva liiklusega alale tagamaks, et kõik puruneb enne kokkupuudet inimestega, kes võivad olla haavatavad.
Negatiivse ruumirõhu korral on ruumis olevatel saasteainetel väga raske ülejäänud rajatisse liikuda. Tervishoiuteenuse osutajad ja teadlased saavad ruumis vabalt liikuda ja tavaliselt toetuvad väikesele eesruumile selle ja ümbritseva keskkonna vahel, et minimeerida uste avamisest ja sulgemisest tingitud rõhuerinevusi. Pärast ruumis töötamist võib osutuda vajalikuks desinfitseerida, riideid vahetada või võtta muid meetmeid tervise ja ohutuse kaitsmiseks.
Negatiivse ruumirõhuga keskkonnas viibivad patsiendid ei tohiks märgata midagi ebatavalist. Ventilatsioonisüsteem on diskreetne ega sega und ega vestlusi. Regulaarsed õhuvahetused hoiavad keskkonna värskena ning filtrid võivad töödelda ka ringlevat õhku. Kui ruum hakkab tundma umbset või sulguvat, võib see olla märk sellest, et ventilatsioonisüsteem ei tööta korralikult ning tehnik peaks seda hindama ning tegema vajalikud kohandused või parandused.