Nikotiini saab tuvastada erinevate testidega, mis mõõdavad kotiniiniks nimetatava kemikaali taset. Keha toodab kotiniini ainult siis, kui nikotiin satub kehasse, näiteks sigarettide, piibutubaka, nuusktubaka, sigarite või närimistubaka kasutamisega. Kotiniini saab määrata inimese vere, juuste, sülje või uriini analüüsiga. Testide tulemused võivad näidata, kas inimene on praegune või endine tubakatarbija.
Nikotiinitesti võib teha mitmel erineval põhjusel. Vanemad kasutavad mõnikord teste, et teha kindlaks, kas nende lapsed on suitsetanud. Mõnede ettevõtete tervisekindlustuse pakkujad nõuavad potentsiaalse töötaja terviseriskide hindamiseks nikotiini testimist. Testimist saab kasutada ka suitsetamisest loobumise programmides, lapse hooldusõigusega seotud juhtudel, kui isik taotleb elukindlustust või uurimistöö eesmärgil.
Uriinianalüüs on nikotiini testimiseks tavaliselt kasutatav meetod. Kotiniini taset uriinis mõõdetakse testriba abil või mõne tilga uriini asetamisega testkettale. Kotiniini sisaldav uriin reageerib testitavate materjalidega ja näitab positiivset või negatiivset tulemust. Kodused uimastitestide komplektid on apteekides või Interneti kaudu hõlpsasti saadaval neile, kes soovivad nikotiini testimist eraviisiliselt läbi viia. Nikotiini uriinianalüüs kehtib umbes neli päeva pärast seda, kui inimene oli viimast tubakatarbimist.
Sülje hindamine nikotiini testimiseks on uriinianalüüsiga sarnane protsess. Selle hindamise jaoks asetatakse süljeproov testribale ja see annab tulemuse umbes poole tunniga. Kuigi nikotiini sülje test annab järjekindlaid ja täpseid tulemusi, võib see passiivse suitsuga kokkupuutel näidata positiivset näitu. Vanemad kasutavad mõnikord kodus süljetesti, et teha kindlaks, kas nende lapsed on suitsetanud.
Vereanalüüs nikotiini testimiseks ei ole nii usaldusväärne kui uriini- või süljeanalüüs. Kui inimene tarvitab tubakat, tõuseb nikotiini tase veres peaaegu kohe ja püsib seal kauem kui kaks nädalat. Vere nikotiini tase võib varieeruda sõltuvalt inimese ainevahetusest, kasutatud tubaka tüübist ja sellest, kui sügavalt suitsu sisse hingatakse. Mõned tööandjad eelistavad vereanalüüsi, sest nad saavad samaaegselt kontrollida nikotiini ja illegaalsete uimastite sisaldust.
Kotiniin võib jääda juuksefolliikulisse kuni aasta pärast seda, kui inimene on tubakatarbimisest loobunud. Nikotiini testimine juukseproovidega on kulukas ja kindlustusseltsid või tööandjad kasutavad seda harva. Üldiselt piirdub see uuringutega, mis mõõdavad passiivse suitsetamise mõju mittesuitsetajatele. Seda tüüpi testi jaoks sobivad juuksed mis tahes kehaosast.