Pipetid on teatud tüüpi laboriseadmed, mida kasutatakse väga väikeste vedelikukoguste mõõtmiseks ja ülekandmiseks. Pipetti mõõtmise täpsus ja täpsus on vajalikud, kuna mis tahes lahknevused väljastatavates kogustes võivad mõjutada katse tulemusi. Täpsuse tagamiseks on vaja pipeti kalibreerimist iga paari kuu tagant kontrollida. Kalibreerimisprotsess aitab kontrollida, kas seadmed väljastavad õigeid koguseid või mitte, et seda saaks parandada, kui see ei ole nii.
1
Koguge kokku vajalikud materjalid. Pipeti kalibreerimise kontrollimiseks vajate pipetti, pipetiotsikuid, destilleeritud vett, keeduklaasi, termomeetrit, kaalu ja kaalumispaate. Maksimaalselt 1 µL mikropipettide kalibreerimiseks peab kaal vastama mikrogrammidele. Te ei vaja rohkem kui 5 ml vett. Täitke keeduklaas veega. Veenduge, et pipetiotsad oleksid õiged, mis sobivad pipetiga korralikult.
2
Mõõtke destilleeritud vee temperatuur. Asetage termomeeter vette ja laske sellel vähemalt üks minut seista. Kui termomeetri punane joon ikka liigub, jätke see veel minutiks seisma. Minuti pärast registreerige temperatuur märkmikusse. Kui olete lõpetanud, eemaldage termomeeter ja kuivatage see. Vee temperatuuri teadmine on oluline kalibreerimise kontrollimiseks tehtavate arvutuste jaoks.
3
Asetage kaalupaat kaalule ja nullige see välja. Ideaalis kasutate kaalu, millel on uksed ja mis on isoleeritud kamber. Asetage kaalupaat kambrisse ja sulgege uksed. Kui teil pole uksi, asetage kaalupaat lihtsalt kaalule. Vajutage nuppu “Null” või “Taara” ja oodake, kuni kaal on null. Kaalu nullimisel lahutatakse plastpaadi kaal ja saate mõõta ainult paati pandava eseme kaalu.
4
Valmistage pipett kalibreerimiseks ette. Enne alustamist pühkige pipett etanooliga, et eemaldada kõik saasteained, ja veenduge, et miski ei ummista pipeti otsa. Asetage sobiv ots otsa ja määrake maht, mida soovite testida. Kalibreerimiseks katsetage nii väikseimat kui ka suurimat pipeti maht.
5
Enne kalibreerimist loputage otsik. Vajutage nuppu esimese piirini ja torgake ots destilleeritud vette nii, et umbes 2 mm oleks vedelikku sukeldatud. Vabastage nupp, et vedelikku aspireerida, ja seejärel väljutage vedelik uuesti, vajutades nuppu alla. Korrake seda kolm korda, et otsa eelloputada. Vajutage nupp teise piirini, et väljutada otsikusse jäänud vedelik ja eemaldada pipett veest.
6
Aspireerige kalibreerimismaht. Kui ots on vedelikust väljas, vajutage nuppu alla kuni esimese piirini. Asetage umbes 2 mm otsikut destilleeritud vette ja vabastage nupp, et vedelik otsikusse aspireerida. Oodake umbes 1 sekund enne otsiku veest eemaldamist. Veenduge, et ots oleks kogu aspiratsiooniprotsessi ajal täielikult vees. Te ei soovi, et otsikusse tekiks mullid, vastasel juhul on tulemused valed.
7
Doseerige vedelik kaalul olevasse kaalukaussi. Asetage ots vastu kaalupaadi põhja ja vajutage nuppu alla kuni esimese peatuseni. Liikuge teise kohta, mis on veest veidi eemal, ja vajutage nuppu teise peatuseni. Hoidke nuppu all, tõstke ots kaalupaadist eemale. Hoidke ots pipeti peal, kuna kasutate seda uuesti kalibreerimiskatsete kaalumiseks. Veenduge, et ots ei puudutaks midagi.
8
Märkige kaal kaalule. Kui kasutate kambrikaalu, sulgege uks. Oodake, kuni numbrid ei muutu. Salvestage see number oma märkmikusse. Enne selle salvestamist on oluline oodata, kuni number on stabiliseerunud. Kui te ei oota, on teie näidud valed.
9
Korrake seda protsessi, et saada vähemalt 10 näitu. Viige kaal nulli, loputage otsik eelnevalt, aspireerige sama maht, doseerige kogus ja seejärel registreerige kaal. Soovite teha mitu sama helitugevusega salvestist ja seejärel saate need kõik kokku keskmistada. Saate seda sama protsessi korrata erinevate helitugevustega seni, kuni võtate ühe köite kohta mitu näitu.
10
Määratlege arvutatud mahu valem. Valem pipetiga väljastatava mahu arvutamiseks on V = w * Z kus w on vee kaal, Z on vee tihedusel põhinev teisendustegur ja V on väljastatud vee arvutuslik maht .Muutuja Z leiate, otsides vee tihedust, kasutades katse alguses registreeritud temperatuuri. Näiteks: kui vee temperatuur oli 23 °C, siis kasutate Z väärtust 1,0035 µg/ mg.
11
Keskendage kordusi koos. Peaksite pipetiga väljastatava vee mahtu vähemalt 10 korda kaaluma. Kõigi nende väärtuste keskmise arvutamiseks liitke need kõik kokku ja jagage 10-ga. Kui tegite rohkem või vähem katseid, liidage iga katse kokku ja jagage katsete koguarvuga. Näiteks: kümme kaalu, mille olete salvestanud 10 µl pipeti maht on järgmine: 9,89, 10,01, 10,02, 9,99, 9,95, 10,04, 9,96, 10,01, 9,99 ja 9,98. Keskmine on: (9,89 + 10,01 +1,9 +1,9 +1,09 +10,09 9,99 + 9,98)/10 = 99,84/10 = 9,984
12
Ühendage muutujad võrrandiga ja lahendage. Kui olete iga muutuja jaoks õiged arvud kindlaks määranud, saate need võrrandisse ühendada ja arvutatud mahu jaoks lahendada. Lahendamiseks korrutage kõigi katsete keskmine kaal Z väärtusega. Näiteks: V = w * Z = 9,984 * 1,0035 = 10,019
13
Arvutage pipeti täpsus. Täpsuse arvutamiseks võite kasutada võrrandit A = 100 x Vavg/V0, kus A on pipeti täpsus, Vavg on keskmine arvutatud maht ja V0 on väärtus, mille määrate pipeti doseerimiseks. Täpsus peaks olema vahemikus 99–101%.Kui pipett on korralikult kalibreeritud, peaks arvutatud väärtus olema väga lähedal pipetile määratud tegelikule väärtusele.Näiteks: A = 100 x Vavg/V0 = 100 x 10,019/10 = 100 x 1,0019 = 100,19% See konkreetne pipett on korralikult kalibreeritud.
14
Vajadusel saatke pipett kalibreerimiseks. Kui teie pipett ei läbi kalibreerimiskatset, lõpetage kohe selle kasutamine katseteks. Pipetid on väga õrnad ja kallid laboriseadmed. Te ei saa kalibreerimist ise parandada, seega peate need õigeks hoolduseks saatma. Teise võimalusena tulevad mõned ettevõtted teie laborisse ja kalibreerivad seal teie pipetid. Teenindamiseks võtke ühendust ettevõttega, kes toodab teie konkreetset marki pipete.