Bakterite kasvu mõõtmiseks on palju viise ja mõned neist on keerulisemad kui teised. Ehkki ohverdate oma mõõtmistes teatud järjepidevuse, on kõige lihtsamad meetodid piisavalt täpsed ja neid kasutatakse sageli. Tuntumad meetodid on bakterite vaatlemine ja loendamine, märja või kuivmassi mõõtmine ning hägususe mõõtmine. Teie kooli laboris peaksid olema seadmed ja tarvikud vähemalt ühe katse läbiviimiseks.
1
Koguge oma materjalid kokku. Lisaks enamikes bioloogialaborites leiduvatele tööriistadele on teil ka mõned spetsiaalsed tööriistad. Kui olete oma instrumendid ja mahutid enne tähtaega kaasas, saate katse lõpule viia, ilma et peaksite kapi juurde edasi-tagasi jooksma. Oluline on teada, milleks iga tükki ette kasutatakse. Peaksite teadma ka mõningaid põhitermineid. Hankige loenduskamber. Nendel tööriistadel on sisseehitatud kamber, slaid ja mikroskoop, nii et neid on lihtne seadistada ja kasutada. Saate neid osta labori- ja klassiruumi varustusettevõtetest. Nendega on kaasas juhised, mis juhendavad teid kogu protsessi käigus. Hankige valamisplaat või laotamisplaat. Need on mahutid, milles näete baktereid. Kultuur on termin, mida kasutatakse katseks kunstlikult kasvatatud organismi kirjeldamiseks. Puljong on vedel sööde, milles kultuur kasvab.
2
Kasutage oma valamisplaati või laotamisplaati. Samuti võite asetada bakterid otse plaadile, et neid mikroskoobi all vaadata. Kandke kultuur plaadile ja asetage mikroskoobi alla. Jälgige, kui palju bakterirakke on.
3
Veenduge, et teil oleks õige kontsentratsioon. Kui baktereid on liiga palju, kattuvad need ja te ei saa täpset loendust. Lahjendage kultuur, segades seda rohkema puljongiga. Kui neid on liiga vähe, ei piisa täpse arvu jaoks. Filtreerige puljong filtreerimissüsteemi abil või lisage rohkem kultuuri, kui see on teile kättesaadav.
4
Loendage baktereid. Viimane samm on nende füüsiline loendamine. Vaadake läbi loenduskambril oleva luubi ja kirjutage üles, kui palju te näete. Võrrelge seda teiste testidega.
5
Veenduge, et teil oleks õige varustus. See hõlmab kallite seadmete kasutamist ja on aeganõudev. Kui teie laboris pole õigeid seadmeid, kaaluge mõne muu meetodi proovimist. Kui aga võimalik, annab märja ja kuiva massi mõõtmine järjekindlama näidu. Vaja läheb: Hüdraulilist gravitatsiooniga konvektsioonahju Alumiiniumist kaalupanni Kolbide komplekti Tsentrifuugi või laboratoorset filtreerimissüsteemi
6
Veenduge, et teie kultuur oleks kolvis. Kui ei, siis vala see ühte. Selles etapis peaks see olema puljongis, kuigi see eraldatakse hiljem uuesti.
7
Kuivatage oma laboriahjus alumiiniumist kaalupann. Alternatiiviks on tselluloosatsetaatfiltri membraan, läbimõõduga 47 mm, pooride suurusega 0,45 µm. Olenemata sellest, kumba kasutate, kaaluge seda enne kuivatamist, et teaksite hiljem, kui palju bakterirakke on mõõtmisest lahutada.
8
Segage kolbi, kuhu panite oma kultuuri, nii et see seguneks ühtlaselt. Rakud vajuvad loomulikult gravitatsiooni mõjul. Segage neid, et veenduda, et need on kolvis ühtlaselt jaotunud. Nii saad esinduslikuma proovi.
9
Kasutage tsentrifuugi, et eraldada bakterirakud puljongist. See tööriist keerutab kolbi ja vastukaalu kiiresti, nõrgendades puljongi ja lahkudes kultuurist. Protsessi üksikasjalikuma kirjelduse saamiseks vaadake seda juhendit.
10
Kraapige pasta välja ja asetage see kaalukausile. Visake puljong ära. Teil pole seda enam vaja, kuid kolbi on vaja, nii et hoidke sellest kinni.
11
Loputage tsentrifuugi ja valage loputusvesi pannile. Lisage bakterirakkudele loputusvee kolb. See annab teile märgkaalu.
12
Leidke kuivkaal. Kuivkaalu mõõtmiseks asetage pann ahju ja kuivatage 100 °C juures 6–24 tundi, järgides konkreetse ahju ja/või kaalukausi juhiseid. Veenduge, et te ei oleks sellest temperatuurist üle, et bakterid ei põleks. Pärast kuivatusprotsessi lõppu kaaluge baktereid ja pidage meeles, et kuivkaalu saamiseks lahutage kaalukausi kaal.
13
Hankige vajalik varustus. Teil on vaja valgusallikat ja spektrofotomeetrit. Need on saadaval teaduslaboritarvete kauplustes. Spektrofotomeetril on juhised ostetud mudeli õigeks kasutamiseks. See seade on odav ja hõlpsasti kasutatav, seega on see üks levinumaid meetodeid bakterite kasvu mõõtmiseks.
14
Sisestage valgus läbi proovi. Tavapäraselt öeldes on hägusus teie proovi hägune. Peaksite saama hägususe näidu, mida mõõdetakse NTU-s (Nefelomeetrilised hägususühikud). Teie spektrofotomeeter võib enne proovi hägususe täpset mõõtmist veidi kalibreerida, seega tutvuge enne kasutamist tootja kasutusjuhendiga.
15
Tee mõned märkmed. Hägusus vastab bakterite hulgale proovis. Spektrofotomeeter näitab teile ka ülekande protsenti (%T). See arv on suurem, kui hägusus on väiksem. Bakterite kasvu mõõtmiseks võrrelge oma numbreid erinevatest testidest.